霉菌酵母菌测试片 1、原理及适用范围
霉菌和酵母菌广泛存在于空气、水和土壤中,绝大部分对人体无害,但有些霉菌对人体有害,比如说黄曲霉,它分泌的黄曲霉毒素是一种强致癌物。霉菌还可引起食物霉变,会刺激人体消化道、胃部等,严重的还可损伤肝脏,造成食物中毒。霉菌酵母菌测试片(FilmplateTM Enumeration of moulds and yeasts BM207)由营养培养基、吸水凝胶和酶显色剂等组成。与传统方法相比,省去了配制培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作,随时可以开始进行抽样检测,而且操作简便,通过酶显色剂的放大作用,使菌落提前清晰地显现出来,培养时间由一周缩短为72h。本品可用于各类食品(如糕点、饼干等)中霉菌和酵母菌的计数,非常适合于食品卫生检验部门和食品生产企业使用。执行标准:食品安全国家标准 食品微生物学检验霉菌和酵母计数(GB/T 4789.2010)。
2、操作方法
2.1、样品处理:取样品25mL(g)放入含有225mL无菌水的取样罐或均质杯内,振摇30min,制成1:10的样品匀液,用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL无菌水的试管内,反复吸吹50次成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。
2.2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将置于平坦实验台面,揭开上层膜,用无菌吸管吸取1mL样品匀液慢慢均匀地滴加到纸片上,然后再将上层膜缓慢盖下,静置10s左右使培养基凝固。每个稀释度接种两片,同时用无菌水做空白阴性对照。
2.3、培养:将测试片叠在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒温培养箱内,堆叠片数不超过12片。培养温度为28℃±1℃,培养48~72h。
3、结果判读
霉菌和酵母菌在测试片上生长后会显示蓝色斑点,霉菌菌落显示的斑点略大呈放射状,酵母菌落则较小而圆滑,许多霉菌在培养后期会呈现其本身*的颜色。选择菌落数在10CFU~150CFU的纸片进行计数,计算两个测试片的平均值乘以稀释倍数后即为每毫升(克)样品中霉菌和酵母菌的数目。
4、计数原则及报告方式
4.1计数
4.1.1 若所有稀释度的平均菌落数均大于150CFU,则对稀释度zui高的测试片进行计数,按平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见例1)。
4.1.2 若所有稀释度的平均菌落数均小于10CFU,则应按稀释度zui低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见例2)。
4.1.3 若所有的稀释度(包括液体样品原液)均无菌落生长,则以小于1乘以zui低稀释倍数报告之(见例3)。
4.2报告
4.2.1 菌落数在100以内时,按“四舍五入”原则修约,采用两位有效数字报告。
4.2.2 菌落数大于或等于100时,前三位数字采用“四舍五入”原则修约后,取前两位数字,后面用0代替位数,也可用10的指数形式来表示,按“四舍五入”原则修约后,采用两位有效数字。
4.2.3 称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
例次 稀释度及菌落数 选定计数
稀释度 报告方式
(CFU/g或CFU/mL)
10-1 10-2 10-3
1
2
3 多不可计
8
0 352
5
0 169
1
0 10-3
10-1
<1×10 3.0×10 5
8.0×10
<1×10
5、附加说明
由于霉菌常以孢子的形式在空气中到处传播,而多种样品是要求霉菌酵母菌不得检出,因此检测霉菌时需特别小心操作,取样用品、稀释用水和吸管吸头等都需仔细消毒,接种时尽量避免空气流动,动作要干净利落,每次用无菌水接两片空白对照,以免出现假阳性结果。
6、保存条件
本产品需存放在4℃~10℃冰箱中,保质期为一年,铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好,放到冰箱中,一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水,在拆封前将整包回温至室温。
:李菲 :